паге_баннер

Квантитативна вредност Цт флуоресценције детекције нуклеинске киселине – параметар љубави и мржње

Квантитативна вредност Цт флуоресценције детекције нуклеинске киселине – параметар љубави и мржње

„Нови програм дијагностике и лечења пнеумоније коронарног вируса (пробно девето издање)“ користи Цт вредност детекције нуклеинске киселине ≥35 као једну од важних основа за ослобађање од изолације или отпуста.Дакле, шта представља Цт вредност комплета за детекцију нуклеинске киселине?Да ли су вредности Цт различитих комплета упоредиве?Да ли што је нижа вредност Цт, то су боље перформансе комплета?
Цт вредност (Тхресхолд Цицле, Цт) је број ПЦР циклуса када интензитет квантитативног флуоресцентног сигнала флуоресценције у реалном времену премаши постављени праг.Комплети за детекцију нуклеинске киселине узимају нову круну као пример.За исту реакцију истог комплета за откривање два узорка који садрже вирус, А и Б, величина Цт вредности представља, у одређеној мери, број копија вирусног гена, односно вирусно оптерећење.Што је нижи Цт узорка Б, то је веће вирусно оптерећење.Вредност Цт је обрнуто пропорционална вирусном оптерећењу и његовој инфективности.Предности и мане различитих квантитативних комплета за флуоресценцију у реалном времену не могу се проценити само по величини Цт вредности, јер вредности Цт различитих комплета нису упоредиве.Процена перформанси комплета треба да се мери са аспеката осетљивости (минимална граница детекције), специфичности, прецизности, стабилности и дијагностичке примене.Сваки произвођач реагенса има својих осамнаест врста борилачких вештина, и оне имају своје магичне моћи у примени, тако да нећу улазити у детаље.
За конвенционалне инструменте/системе за квантитативну ПЦР (КПЦР) анализу у реалном времену, добијање Цт вредности и њихова широка употреба у апликацијама за откривање патогена су свима познати.Са развојем индустрије и напретком технологије, КПЦР опрема и реагенси наишли су на могућности и изазове.Ииоу Тхинк Танк (Извештај о истраживању кинеске индустрије генетског тестирања за 2021.: технологија) анализирао је да се већина компанија у КПЦР индустрији моје земље суочава са уобичајеним проблемима заснованим на технологији.Као одговор на ове проблеме, решења су углавном подељена у два типа: убрзање унапређења технологије и примена нових технологија.
ПОЦТ за КПЦР молекуларну дијагностику је један од развојних праваца индустрије, а побољшање перформанси је важан фактор за убрзање примене технологије.За ПОЦТ опрему са пропусношћу једног узорка КПЦР-а, како оптимизовати вредност Цт кључног параметра једне реакције у истраживању и развоју?Иста опрема, исти реакциони систем и иста концентрација шаблона, теоретски што је већа Цт вредност једне реакције, то је нижа ефикасност ензима у реакцији.
У процесу побољшања ефикасности ензимске реакције и оптимизације вредности Цт, најпре се може анализирати типична крива квантитативне амплификације флуоресценције 40 ПЦР циклуса.Крива појачања на доњој слици је подељена на позадинску фазу флуоресценције, фазу експоненцијалне амплификације, линеарну фазу и фазу платоа.Да би се постигла нижа позадина флуоресценције, колико је то могуће да се разликује од вредности флуоресценције ране експоненцијалне амплификације, потребно је тестирати са носача потрошног материјала за реакцију, скрининга дизајна прајмер сонде и реакционог пуферског система.Период експоненцијалне амплификације је најдиректнија реакција ензимске активности, а такође је и доказ савршене координације ПОЦТ опреме, носача реакције и реагенаса.У овом тренутку, контрола температуре опреме, аквизиција и анализа оптичког сигнала, биокомпатибилност носача и перформансе система реагенаса треба да се подесе и тестирају у свим аспектима.Коначно, комплетно појачање је завршено, а резултати морају бити представљени ригорозним алгоритмом података да би се добила разумна вредност Цт.
ЦТ линија
Мали корак у оптимизацији Цт вредности су безбројни кораци особља за истраживање и развој.У стрепњи и узбуђењу дана и ноћи, сваки пут када се „нигде не виде планине и реке, тамне су врбе и цвеће светло и има друго село“, што нам даје храброст и страст да идемо напред опет.


Време поста: 29.09.2022